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植物茎尖培养

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-08-03   浏览次数:2784

苗木知识导读: 植物是生命的主要形态之一,包含了如树木、灌木、藤类、青草、蕨类、及绿藻、地衣等熟悉的生物。种子植物、苔藓植物、蕨类植物
西北苗木网2016-08-03日信息:    植物是生命的主要形态之一,包含了如树木、灌木、藤类、青草、蕨类、及绿藻、地衣等熟悉的生物。种子植物、苔藓植物、蕨类植物和拟蕨类等植物中,据估计现存大约有 350 000个物种。绿色植物大部分的能源是经由光合作用从太阳光中得到的,温度、湿度、光线是植物生存的基本需求。植物共有六大器官:根、茎、叶、花、果实、种子。植物具有光合作用的能力——借助光能及叶绿素,利用水、无机盐和二氧化碳进行光合作用,释放氧气,产生葡萄糖等有机物,供植物体利用。


 
    植物茎尖培养
    1、外植体的选取及预处理 
    ⑴外植体选取 
    选取生长健壮、已发芽、长势较好、无病害的生姜根状茎作为外植体。 
    ⑵材料预处理 
    取带芽的枝条或鳞茎球茎,洗衣粉适量冲洗,然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位(约1cm×1cm大小),顶芽和腋芽、大芽和小芽分开。继续用洗衣粉清洗10分钟,清洗时需不停晃动。再用自来水冲洗干净,置空培养瓶备用。 
    2、超净工作台无菌操作准备 
    检查超净工作台,是否已开机灭菌,酒精灯、酒精瓶、升汞是否齐备、无菌水、培养瓶放置与位置、接种器械是否齐备与放置。 
    3、外植体消毒 
    ⑴蒸馏水冲洗 
    外植体置于已杀菌开机的超净工作台上,新洁尔灭洗液消毒双手,无菌蒸馏水清洗外植体2-3次,需随时晃动。 
    ⑵酒精消毒 
    75%酒精倒入装外植体的容器内,消毒外植体5-60s,时间长短视植物材料情况而定,一般幼嫩材料和室内带菌培养材料消毒时间短,老材料或室外材料消毒时间长。动作一定迅速,需晃动,然后将酒精倒去。整个时间计算以酒精倾倒开始至酒精倒出瓶外为止, 
    ⑶升汞消毒 
    1%生汞倒入装外植体的容器内,消毒外植体5-10min,时间长短视情况而定。需晃动,在最后3min静置,升汞注满容器,将已灼烧的镊子放入容器升汞内浸泡。 
    10%次氯酸钠溶液倒入装外植体的容器内,消毒外植体10-12min,时间长短视情况而定。 
    ⑷蒸馏水清洗 
    用镊子将外植体取出,放入另一无菌蒸馏水瓶中清洗,反复清洗4次。 
    4、材料的整理 
    用灼烧冷却的镊子和剪刀对外植体进行处理,剥离外植体材料芽外部小叶片,露出尖端生长点和2-3片叶原基部分,将此部分剪下做培养材料。再用无菌蒸馏水清洗3-4次。 
    5、接入培养基 
    培养基瓶放入工作台内,将剥离的材料分别用消毒过的镊子放入培养瓶内,盖上瓶盖,置培养篮内,写上培养时间、操作人及培养品名,入培养室培养。 
    6、整理工作 
    清洁整理超净工作台和实验室。 
    (五)实践指导 
    1、操作中严格有菌观念、无菌操作。 
    2、操作前一定先换上工作服、专用鞋、清洁双手。 
    3、超净工作台工作前,检查工作台是否开启紫外灯和风机,酒精灯、消毒器械的酒精、消毒液是否准备齐备。蒸馏水、培养基是否齐备。 
    4、工作时培养基、蒸馏水、消毒液等放置齐整,器械取出后放入消毒液里,用过的溶液、线和报纸放在工作台外。 
    5、接种工具不能碰触瓶口和工作台其它部位,手不能碰触瓶口,更不能伸入瓶内,不能碰触材料。 
    6、无菌水和酒精、升汞处理材料时需不断晃动,便于材料与液体充分接触。 
    7、酒精、升汞处理材料时间必须适宜,时间短消毒效果不理想,时间长会将材料杀死。 
    8、操作细致,水不要洒在工作台上,掉落在台面的材料不能再用。 
    9、操作完毕,须在瓶上注明日期、操作人,便于观察。 
    10、有些同学器械放置很乱,整个超净工作台面乱七八糟,影响效果。
 
 
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