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胚轴接种

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-08-03   浏览次数:2561

苗木知识导读: (一)实践目的 在上次实践基础上进一步学习愈伤组织培养的胚轴切割转接技术,加深对愈伤组织的理解。 (二)实践地点和时间
西北苗木网2016-08-03日信息:    (一)实践目的
    在上次实践基础上进一步学习愈伤组织培养的胚轴切割转接技术,加深对愈伤组织的理解。


 
    (二)实践地点和时间
    植物组培室、建议4学时
    (三)实践用具与材料
    超净工作台、手术剪、枪状镊、解剖刀或刀片、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、记号笔。无菌播种已萌发青豆、无菌播种已萌发豌豆、大量元素、微量元素、维生素、铁盐、BA、2,4—D等母液。
    (四)实践步骤
    1、制备培养基
    为试验观察生长物质对愈伤组织的影响,加深理解,可做对比试验,制备三种培养基
    配方1MS+0.1ml/LBA+0.5ml/L2.4—D
    配方2MS+0.5ml/LBA+0.1ml/L2.4—D
    配方3MS
    2、下胚轴的切割转接
    (1)进行超净工作台开启紫外灯、风机,换鞋、穿工作服、清洁双手等常规操作。检查酒精灯、酒精瓶是否该加酒精。
    (2)将上周无菌播种成活,已经萌芽的种子放入超净工作台,仔细观察种子,把污染的淘汰掉。
    (3)灼烧镊子和解剖刀刀片,冷却,注意不能伤手。
    (4)用工具将萌发种子放入培养皿内滤纸上,看清楚的胚轴位置,用镊子和解剖刀刀片等器械除去子叶和胚根,切割胚轴成5mm左右切段。
    (5)将切割下来的胚轴移入新培养基内,做好标记,三种配方分别移入标记,放入培养室培养。
    3、清洁整理
    按常规清洁整理超净工作台和实验室,注意超净工作台不能用酒精擦拭,地面可用洗衣粉拖地,接种室可进行甲醛加高锰酸钾熏蒸,为以后的实验作准备。
    (五)实训作业
    写出本次实践报告,并写出自己的实践效果和体会
    (六)评分标准
    胚轴识别清楚,胚轴切割转接操作正确,愈伤组织分化成活高,污染小。
 
 
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